2-Nitrophenyl β-D-galactopyranoside Sigma N1127 – ONPG سوبسترا آنزیم β-گالاکتوزیداز
محصول 2-Nitrophenyl β-D-galactopyranoside Sigma-Aldrich N1127 که با نام ONPG (اُرتو-نیتروفنیل β-D-گالاکتوپیرانوزید) نیز شناخته میشود، یک سوبسترای رنگزا و بسیار پرکاربرد در آزمایشهای آنزیمی و زیستمولکولی است. این ماده بهطور گسترده برای تشخیص فعالیت آنزیم β-galactosidase (lacZ) در باکتریها و سیستمهای بیان ژنی استفاده میشود.
ONPG در حضور آنزیم β-galactosidase هیدرولیز شده و به گالاکتوز و o-nitrophenol تبدیل میشود. محصول نهایی به رنگ زرد ظاهر میشود و شدت رنگ آن مستقیماً با میزان فعالیت آنزیمی متناسب است، به همین دلیل این ترکیب یکی از استانداردترین روشها برای سنجش فعالیت ژن lacZ محسوب میشود.
مکانیسم عملکرد
این ماده وارد سلول شده و توسط β-galactosidase شکسته میشود. در نتیجه:
-
گالاکتوز آزاد میشود
-
o-nitrophenol تولید میشود (رنگ زرد)
-
شدت رنگ با فعالیت آنزیم متناسب است
-
امکان اندازهگیری کمی فعالیت ژن lacZ فراهم میشود
این ویژگی باعث شده ONPG یکی از دقیقترین و سریعترین سوبستراها برای تستهای رنگسنجی آنزیمی باشد.
ویژگیهای فنی
-
سوبسترای کروموژنیک β-galactosidase
-
تولید رنگ زرد پس از هیدرولیز
-
خلوص بالا (≥98% enzymatic grade)
-
مناسب برای مطالعات ژنتیکی و میکروبیولوژی
-
محلول در آب و بافرهای استاندارد
-
پودر پایدار در شرایط نگهداری مناسب
کاربردهای اصلی
-
سنجش فعالیت آنزیم β-galactosidase (lacZ assay)
-
تستهای ژنتیکی در باکتریها
-
مطالعات بیان ژن و تنظیم ژنتیکی
-
آزمایشهای میکروبیولوژی و مولکولی
-
بررسی فعالیت پروموترها در سیستمهای گزارشگر
-
تحقیقات بیوشیمی و آنزیمشناسی
مکانیسم رنگزایی
در حضور β-galactosidase، ONPG شکسته شده و o-nitrophenol آزاد میشود. این ترکیب در محیط قلیایی به رنگ زرد تبدیل شده و شدت جذب نوری آن (معمولاً در 420 nm) برای اندازهگیری فعالیت آنزیمی استفاده میشود. این روش یکی از استانداردترین تستها در زیستشناسی مولکولی است.
شرایط نگهداری
در دمای منفی 20 درجه سانتیگراد و دور از رطوبت و نور نگهداری شود. محلولهای آماده باید تازه تهیه شده و در شرایط استریل استفاده شوند تا از کاهش فعالیت جلوگیری شود.
مزایای استفاده
استفاده از این ماده باعث افزایش دقت در سنجش فعالیت ژنی، امکان اندازهگیری کمی و سریع آنزیمها، و کاربرد گسترده در سیستمهای گزارشگر ژنتیکی میشود و یکی از استانداردهای جهانی در آزمایشهای lacZ است.
سایت : www.118lab.ir تأمینکننده تخصصی مواد شیمیایی آزمایشگاهی و صنعتی با تضمین کیفیت و اصالت کالا
⚗️ مجموعهای کامل از محصولات استاندارد برای آزمایشگاهها، مراکز تحقیقاتی و صنایع مختلف
📦 خرید آسان، ارسال سریع و پشتیبانی حرفهای برای تجربهای مطمئن و بدون دغدغه.
ادامه مطلبShow less
